Toma de muestras para análisis de agua: envases, conservación y procedimientos según los parámetros
La muestra tiene que representar el agua estudiada y conservar hasta el análisis las concentraciones de todos sus componentes. Por eso el envase, el volumen, el conservante, la temperatura, el tiempo hasta el análisis y el propio procedimiento de toma dependen del parámetro que se vaya a determinar.
1. Principios generales
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Representatividad: el objetivo del muestreo es obtener una parte representativa del material estudiado que conserve las concentraciones relativas de sus componentes sin cambios significativos hasta el análisis.
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Envases limpios y rotulados con tinta indeleble o etiqueta: identificación de la muestra, fecha y hora (en muestras compuestas, la de la última muestra simple añadida).
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Enjuague: antes de llenarlo, el envase se lava 2 o 3 veces con el agua que se va a recoger, salvo que contenga conservante.
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Parámetros in situ: algunos se determinan en el punto de muestreo porque varían a los pocos minutos de la toma: caudal, gases disueltos (O₂, CO₂), temperatura, desinfectante residual (hipoclorito) y pH.
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Registro y cadena de custodia: fecha y hora, propósito, punto exacto, tipo de muestra, método de conservación, número y volumen de muestras, incidencias y responsable; el precintado de los envases permite detectar adulteraciones.
2. Tipos de envases
| Envase | Uso |
|---|---|
| Plástico (polietileno, politetrafluoroetileno) | Uso general en el protocolo de aguas residuales de la Defensa. |
| Vidrio | Compuestos orgánicos volátiles (con tapón de TFE y sin cámara de aire), aceites y grasas, plaguicidas, carbono orgánico total. |
| Plástico o vidrio lavado con ácido nítrico (1+1) | Metales, en particular cromo VI y mercurio; también fosfato (vidrio lavado con ácido). |
| Envases estériles | Ensayos microbiológicos; en el protocolo de Aragón para Legionella y aerobios, de plástico, con cierre hermético y con neutralizante del desinfectante. |
Llenado: para ensayos físico-químicos en el protocolo de Aragón, el recipiente se llena completamente, sin cámara de aire; en el protocolo de la Defensa para aguas residuales se deja un pequeño espacio para la expansión térmica durante el transporte, salvo para compuestos orgánicos volátiles, que se llenan sin cámara de aire. Para ensayos microbiológicos se deja siempre una pequeña cámara de aire y, una vez cerrado, se voltea el envase varias veces para mezclar el agua con el neutralizante.
Neutralizante: el más utilizado para derivados clorados y biocidas oxidantes es el tiosulfato sódico; los envases comerciales para microbiología suelen llevar 20 mg/L, suficientes para aguas con hasta 4 ppm de cloro residual libre.
3. Conservación de las muestras
Las muestras deben analizarse lo antes posible; el conservante se añade en el momento de la toma (en las compuestas, a cada alícuota, o manteniéndolas a 4 ºC si se usa un muestreador automático). «Refrigerar» significa almacenar a 4 ºC en ausencia de luz. Tabla (protocolo del Instituto de Toxicología de la Defensa, P = plástico, V = vidrio):
| Determinación | Envase | Volumen mínimo (mL) | Conservación | Almacenamiento máximo |
|---|---|---|---|---|
| Alcalinidad | P, V | 200 | Refrigerar | 14 d |
| Carbono orgánico total | V | 100 | Análisis inmediato, o refrigerar y H₃PO₄ o H₂SO₄ hasta pH < 2 | 28 d |
| Cianuro total | P, V | 500 | NaOH hasta pH > 12, refrigerar en oscuridad | 14 d |
| Cloro residual | P, V | 500 | Análisis inmediato | — |
| Conductividad | P, V | 500 | Refrigerar | 28 d |
| DBO | P, V | 1000 | Refrigerar | 48 h |
| DQO | P, V | 100 | Lo antes posible o H₂SO₄ hasta pH < 2; refrigerar | 28 d |
| Fosfato | V (lavado con ácido) | 100 | Para fosfato disuelto, filtrar inmediatamente; refrigerar | 48 h |
| Metales, en general | P | 500 | (Filtrar si se piden disueltos) HNO₃ hasta pH < 2 | 6 meses |
| Cromo VI | P o V lavados con ácido | 300 | Refrigerar | 24 h |
| Mercurio | P o V lavados con ácido | 500 | HNO₃ hasta pH < 2; refrigerar | 28 d |
| Amoniaco | P, V | 500 | Lo antes posible o H₂SO₄ hasta pH < 2; refrigerar | 28 d |
| Nitrato | P, V | 100 | Lo antes posible o refrigerar | 48 h (28 d en muestras cloradas) |
| Nitrito | P, V | 100 | Lo antes posible o refrigerar | 48 h |
| pH | P, V | 50 | Análisis inmediato | — |
| Sólidos en suspensión | P, V | 200 | Refrigerar | 2-7 d |
| Sulfuro | P, V | 100 | Refrigerar; acetato de zinc y NaOH hasta pH > 9 | 7 d |
| Temperatura | P, V | — | Análisis inmediato | — |
| Turbidez | P, V | 100 | Analizar el mismo día; para más de 24 h, oscuridad y refrigeración | 48 h |
| Aceites y grasas | V | 1000 | HCl hasta pH < 2; refrigerar | 28 d |
| Compuestos orgánicos volátiles | V, tapón de TFE | 40 | Refrigerar; HCl hasta pH < 2; ácido ascórbico si hay cloro residual | 14 d |
Para metales disueltos, la muestra se filtra inmediatamente en el punto de muestreo, antes de añadir el ácido.
Microbiología (protocolo de Aragón): aerobios totales, menos de 24 h a 5 ± 3 ºC (100 mL); Legionella, menos de 24 h a 6-18 ºC, o entre 24 y 48 h a 5 ± 3 ºC (1.000 mL). Transporte: las muestras deben llegar al laboratorio lo antes posible y siempre antes de 48 horas; si llegan el mismo día pueden viajar a temperatura ambiente protegidas de la luz y de temperaturas extremas; si no, refrigeradas a 2-8 ºC. Las muestras de agua caliente se refrigeran inmediatamente.
4. Procedimientos de toma en función del parámetro
4.1. Agua de consumo (RD 3/2023, anexo III, parte A)
En el grifo:
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Cobre, plomo y níquel: muestra de un solo grifo, sin descarga previa, mediante muestreo aleatorio diurno de un litro. Si se superan los valores paramétricos y se comprueba que la causa es la instalación interior, pueden usarse otros métodos: descarga previa y estancamiento de 30 minutos antes de tomar la muestra, o muestreo proporcional (una botella conectada al grifo recoge un pequeño porcentaje del agua consumida durante una semana).
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Parámetros microbiológicos: según UNE-EN ISO 19458 (Calidad del agua. Muestreo para el análisis microbiológico).
En la red de distribución, salida de ETAP o depósito: según UNE-ISO 5667-5 (muestreo de agua potable de instalaciones de tratamiento y redes) y, para microbiología, UNE-EN ISO 19458.
Puntos de muestreo (art. 8): al menos uno en la toma de captación o entrada de la ETAP, uno a la salida de la ETAP o depósito de cabecera, uno a la salida de los depósitos de distribución, uno en cada punto de entrega entre operadores, al menos uno en cada red de distribución (y, si suministra más de 20.000 m³/día, al menos 1 por cada 20.000 m³ o fracción), y en la instalación interior uno en el grifo o racor de prueba tras la llave de corte general y otro en el grifo de la vivienda o locales.
4.2. Legionella en instalaciones (protocolo de Aragón)
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Asegurarse de que no se ha hecho limpieza y desinfección ni tratamiento de choque en los 15 días anteriores.
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Acumuladores de ACS: preferiblemente en la purga (parte baja), recogiendo la primera fracción y midiendo la temperatura.
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Red de agua caliente y fría: pre-flush (sin dejar correr: primer litro, representa la colonización del terminal) o post-flush (dejando correr cerca de un minuto hasta temperatura estable: representa el agua circulante). Se priorizan duchas frente a grifos.
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Torres de refrigeración: tubería de retorno o balsa, en el punto más alejado del aporte de agua y de la inyección de biocida.
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Medición de temperatura (agua caliente: abrir el grifo 1 minuto; agua fría: dejar correr 2 minutos) y del biocida residual en el momento de la toma; nunca se introduce un objeto en el recipiente de la muestra microbiológica. En investigación de brotes se toma además biofilm con torunda.
4.3. Aguas residuales
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Muestra simple (puntual): tomada en un tiempo y lugar determinados; representa la composición del agua en ese lugar, tiempo y circunstancias. En el protocolo de la Defensa se usa cuando la autorización de vertido lo permite o en aguas con contaminación exclusivamente fecal.
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Muestra compuesta: combinación de muestras simples tomadas en el mismo sitio a distintos tiempos, para concentraciones promedio. Cada alícuota es proporcional al caudal: Vᵢ = V · Qᵢ / (n · Qₚ) (V volumen total, Qᵢ caudal instantáneo, Qₚ caudal promedio, n número de muestras). Como frecuencia estándar en una jornada de 8 horas, el protocolo de la Defensa propone 125 mL cada 30 minutos hasta unos 2 litros. No se usan muestras compuestas para componentes que cambian durante el almacenamiento, como el cloro residual o el pH. Puede hacerse a mano (manteniendo la botella común refrigerada a 4 ºC y en oscuridad) o con muestreador automático refrigerado.
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Control de depuradoras (RD 509/1996, anexo III): muestras durante 24 horas, proporcionales al caudal o a intervalos regulares, en el mismo punto definido de la salida (y si es necesario de la entrada).
Fuentes: BOE, Real Decreto 3/2023, de 10 de enero (https://www.boe.es/buscar/act.php?id=BOE-A-2023-628); BOE, Real Decreto 509/1996, de 15 de marzo (https://www.boe.es/buscar/act.php?id=BOE-A-1996-7159); Gobierno de Aragón, Servicio de Seguridad Alimentaria y Salud Ambiental, Toma de muestras (https://www.aragon.es/documents/20127/674325/TomaMuestras_F.pdf/330bc9b3-cd7f-0622-039e-bbd2ebcbdaa6); Instituto de Toxicología de la Defensa, Protocolo de toma de muestras de agua residual (https://www.defensa.gob.es/documents/999074/1000840/PROTOCOLO_DE_TOMA_DE_MUESTRAS_DE_AGUA_RESIDUAL_ver_2.pdf); IDEAM, Instructivo de ensayo de metales en agua por ICP óptico (https://www.ideam.gov.co/sites/default/files/mapa-de-procesos/m-s-lc-i026_instructivo_de_ensayo_determinacion_de_metales_en_agua_por_icp_optico_v4.pdf). Consultadas el 07/10/2026.